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Q: ¿Cómo elegir y utilizar las placas ELISA ?

A:1.PLACA ELISA en la enzima de ELISA (enzima Elisa, ELISA), la pureza, concentración y la relación de antígeno anticuerpo, con la etiqueta de anticuerpo o antígeno implicado en la reacción inmunológica; el tipo de búfer, la concentración de iones y condiciones tales como la fuerza, pH y temperatura de reacción y la hora de jugar un papel clave.

2.El poliestireno en fase sólida (poliestireno) superficie como transportista también juega un papel importante en la adsorción de antígenos, anticuerpos o complejos antígeno-anticuerpo.
Los antígenos, anticuerpos y otras biomoléculas son adsorbidas a la superficie de la portadora de una gran variedad de mecanismos, incluyendo la absorción pasiva a través de bonos hidrofóbico, el agua/ionic bonds, unión covalente a través de la introducción de otros grupos reactivos tales como aminoácidos y los grupos de carbono, y modificación de superficie. Bond hidrófila después de la modificación del tratamiento .

3.El tipo de placas ELISA es principalmente seleccionados de acuerdo con el lector de microplacas. Está dividido en desmontable y no desmontable. Para no desmontable, los listones en toda la junta están conectados entre sí, entonces el desmontable, significa que los listones en la junta están separados, y los listones separados están separados. Hay 12 pozos y 8 hoyos. Por lo general, la enzima desmontable etiquetar las placas se utilizan más. Si usted ha comprado algunas de dichas placas, antes, usted puede comprar alguna enzima-etiquetados listones. Aunque las microplacas realizados por diferentes fabricantes similares en general, algunos pequeños detalles serán diferentes, tales como la estructura, etc. Esto es principalmente porque debe ser utilizado con distintos lectores de microplacas. También la posibilidad de lo que su lector de microplacas se parecerá a la hora de elegir comprar microplacas. Sin embargo, por lo general son adecuados, y sólo individuales serán diferentes. Porque el material de la microplaca es generalmente poliestireno (PS), y la estabilidad química de poliestireno es pobre, puede ser disuelto por una variedad de disolventes orgánicos (tales como hidrocarburos aromáticos, los hidrocarburos halogenados, etc.), y corroído por ácidos y álcalis , no resistentes a la grasa, fácil de cambiar de color después de estar expuesto a la luz ultravioleta, así que asegúrese de prestar atención a estos durante su uso.

4.El enlace de alta placa ELISA
La capacidad de adsorción de proteínas de la placa ELISA después de la superficie TC el tratamiento es mucho mayor, llegando a 300-400 ng 1gG/cm2, y el peso molecular de la principal proteína de enlace es >10kD. El uso de este tipo de placa ELISA puede mejorar la sensibilidad y relativamente puede reducir la concentración y dosis de la proteína recubierto, pero la desventaja es que es fácil de producir reacciones no específica. Después de antígeno o anticuerpo recubrimiento, los detergentes no iónicos no puede bloquear los sitios de la proteína efectivamente independiente y las proteínas como un agente de bloqueo es obligatorio

5.adsorción media placa ELISA
La placa ELISA pasivamente está obligado a blanco hidrofóbico de la superficie a través de bonos, y es adecuado como portador de una fase sólida macromoleculares de proteínas con un peso molecular de la 20D, y su capacidad de adsorción de proteínas es de 200-300 ng 1gG/cm2. Dado que este tipo de placa ELISA sólo se une a las macromoléculas, es adecuado para su uso como una fase de sólido unpurified portador de anticuerpos o antígenos, que puede reducir el riesgo no específicos de reacción cruzada. Este tipo de placa puede ser utilizado como solución de bloqueo con la proteína inerte o detergentes no iónicos

6.La placa Aminase
Después de la modificación de superficie, el alcohol etiqueta tiene un grupo amino cargado positivamente, y su vínculo hidrófobas es sustituido por un agua-matar a bond. Este tipo de placa ELISA es adecuada como un portador de fase sólida para las pequeñas proteínas moleculares. Con el búfer apropiado y pH, su superficie puede obligar a las pequeñas moléculas cargadas negativamente iónica a través de bonos. Debido a las propiedades hidrofílicas de su superficie y su capacidad para enlazar covalentemente a través de otros agentes de reticulado, puede ser utilizado para inmovilizar moléculas de proteínas disueltas en los detergentes, tales como el tritón-100 y Tween20. La desventaja de este tipo de placa es que debido a la reducción de la hidrofobicidad, algunas moléculas de proteína no puede obligarse; además, la superficie debe ser efectivamente bloqueada. Debido a la hidrófila y propiedades de la superficie covalente, la solución de bloqueo debe ser capaz de interactuar con los no-reactiva grupos amino y los grupos funcionales en el elegido crosslinker.

7.La adsorción de proteínas la determinación de las placas ELISA
Placas de poliestireno en blanco para ELISA puede recubrirse con una concentración conocida de una proteína solución. Después de la capa, la concentración de proteínas de la solución en el pozo fue medido. La cantidad de proteína en el revestimiento antes de menos la cantidad de proteína después de la capa es la cantidad de proteína adsorbido en la placa ELISA. De esta manera, la capacidad de adsorción de la placa ELISA puede ser conocido.

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